שמן Saposhnikovia divaricata טהור לייצור נרות וסבון שמן אתרי מפזר סיטונאי חדש עבור מפיצי מבערי קנים

שמן אתרי Saposhnikovia divaricata טהור לייצור נרות וסבון שמן אתרי מפזר סיטונאי חדש עבור מפיצי מבערי קנים תמונה מוצגת

תיאור קצר:

2.1. הכנת SDE

קני השורש של SD נרכשו כצמח מיובש מ-Hanherb Co. (Guri, קוריאה). החומרים הצמחיים אושרו מבחינה טקסונומית על ידי ד"ר גו-יה צ'וי מהמכון של קוריאה לרפואה מזרחית (KIOM). דגימת שובר (מספר 2014 SDE-6) הופקדה בעשבון הקוריאני של משאבי צמחים סטנדרטיים. קני שורש מיובשים של SD (320 גרם) חולצו פעמיים עם 70% אתנול (עם ריפלוקס של 2 שעות) ולאחר מכן התמצית רוכזה בלחץ מופחת. המרתח עבר סינון, ליאופיל, ואוחסן ב-4 מעלות צלזיוס. התשואה של תמצית מיובשת מחומרי מוצא גולמיים הייתה 48.13% (w/w).

2.2. ניתוח כרומטוגרפיה נוזלית כמותית בעלת ביצועים גבוהים (HPLC).

ניתוח כרומטוגרפי בוצע עם מערכת HPLC (Waters Co., Milford, MA, ארה"ב) וגלאי מערך פוטודיודות. עבור ניתוח HPLC של SDE, הפרי-Oתקן glucosylcimifugin נרכש מהמכון לקידום מכירות של קוריאה לתעשיית הרפואה המסורתית (Gyeongsan, קוריאה), וכןsec-O-glucosylhamaudol ו-4′-O-β-D-glucosyl-5-O-methylvisaminol בודדו במעבדה שלנו וזוהו על ידי ניתוחים ספקטרליים, בעיקר על ידי NMR ו-MS.

דגימות SDE (0.1 מ"ג) הומסו ב-70% אתנול (10 מ"ל). הפרדה כרומטוגרפית בוצעה עם עמודת XSelect HSS T3 C18 (4.6 × 250 מ"מ, 5μm, Waters Co., Milford, MA, ארה"ב). השלב הנייד כלל מאצטוניטריל (A) ו-0.1% חומצה אצטית במים (B) בקצב זרימה של 1.0 מ"ל לדקה. נעשה שימוש בתוכנית שיפוע רב-שלבית כדלקמן: 5% A (0 דקות), 5-20% A (0-10 דקות), 20% A (10-23 דקות), ו-20-65% A (23-40 דקות) ). אורך גל הזיהוי נסרק ב-210-400 ננומטר ונרשם ב-254 ננומטר. נפח ההזרקה היה 10.0μL. פתרונות סטנדרטיים לקביעת שלושה כרומונים הוכנו בריכוז סופי של 7.781 מ"ג/מ"ל (פרי-O-glucosylcimifugin), 31.125 מ"ג/מ"ל (4′-O-β-D-glucosyl-5-O-מתיל ויסאמינול), ו-31.125 מ"ג/מ"ל (sec-O-glucosylhamaudol) במתנול ונשמר ב-4 מעלות צלזיוס.

2.3. הערכת פעילות אנטי דלקתיתבַּמַבחֵנָה

2.3.1. תרבית תאים וטיפול בדגימות

תאי RAW 264.7 התקבלו מאוסף American Type Culture Collection (ATCC, Manassas, VA, ארה"ב) וגודלו במדיום DMEM המכיל 1% אנטיביוטיקה ו-5.5% FBS. תאים הודגרו באווירה לחה של 5% CO2 ב-37 מעלות צלזיוס. כדי לעורר את התאים, המדיום הוחלף במדיום DMEM טרי, וליפופוליסכריד (LPS, Sigma-Aldrich Chemical Co., St. Louis, MO, ארה"ב) ב-1μגרם/מ"ל נוספה בנוכחות או בהיעדר SDE (200 או 400μגרם/מ"ל) למשך 24 שעות נוספות.

2.3.2. קביעת תחמוצת החנקן (NO), פרוסטגלנדין E2 (PGE2), גורם נמק גידול-α(TNF-α), וייצור Interleukin-6 (IL-6).

תאים טופלו ב-SDE ועוררו ב-LPS למשך 24 שעות. ייצור NO נותח על ידי מדידת ניטריט באמצעות ריאגנט Griess על פי מחקר קודם [12]. הפרשת הציטוקינים הדלקתיים PGE2, TNF-α, ו-IL-6 נקבע באמצעות ערכת ELISA (מערכות מו"פ) לפי הוראות היצרן. ההשפעות של SDE על ייצור NO וציטוקינים נקבעו ב-540 ננומטר או 450 ננומטר באמצעות Wallac EnVision™קורא microplate (PerkinElmer).

2.4. הערכה של פעילות אנטי-אוסטאוארטריטיסב-Vivo

2.4.1. בַּעֲלֵי חַיִים

חולדות Sprague-Dawley זכרים (בני 7 שבועות) נרכשו מחברת Samtako Inc. (אוסאן, קוריאה) ושוכנו בתנאים מבוקרים עם מחזור אור/חושך של 12 שעות בשעהמעלות צלזיוס ו% לחות. חולדות קיבלו דיאטת מעבדה ומיםבאופן חופשי. כל ההליכים הניסויים בוצעו בהתאם להנחיות המכון הלאומי לבריאות (NIH) ואושרו על ידי ועדת הטיפול והשימוש בבעלי חיים של אוניברסיטת דיג'און (דייג'ון, הרפובליקה של קוריאה).

2.4.2. אינדוקציה של OA עם MIA בחולדות

החיות חולקו באקראי והוקצו לקבוצות טיפול לפני תחילת המחקר (לכל קבוצה). תמיסת MIA (3 מ"ג/50μL של 0.9% מי מלח) הוזרק ישירות לחלל התוך מפרקי של ברך ימין תחת הרדמה המושרה עם תערובת של קטמין וקסילאזין. חולדות חולקו באופן אקראי לארבע קבוצות: (1) קבוצת מלוחים ללא הזרקת MIA, (2) קבוצת MIA עם הזרקת MIA, (3) הקבוצה שטופלה ב-SDE (200 מ"ג/ק"ג) עם הזרקת MIA, ו-(4) ) הקבוצה שטופלה ב-indomethacin (IM-) (2 מ"ג/ק"ג) עם הזרקת MIA. חולדות ניתנו דרך הפה עם SDE ו-IM שבוע לפני הזרקת MIA למשך 4 שבועות. המינון של SDE ו-IM ששימשו במחקר זה התבסס על אלו שהועסקו במחקרים קודמים [10,13,14].

2.4.3. מדידות של חלוקת משקל נושאת הכפה האחורית

לאחר השראת OA, האיזון המקורי ביכולת נשיאת המשקל של הכפות האחוריות הופרע. בודק אי-יכולת (מכשור לינטון, נורפולק, בריטניה) שימש להערכת שינויים בסבילות נושאת המשקל. חולדות הונחו בזהירות לתוך תא המדידה. הכוח נושא המשקל שהופעל על ידי הגפה האחורית היה ממוצע על פני תקופה של 3 שניות. יחס חלוקת המשקל חושב על ידי המשוואה הבאה: [משקל על גפה אחורית ימנית/(משקל על גפה אחורית ימנית + משקל על גפה אחורית שמאל)] × 100 [15].

2.4.4. מדידות של רמות ציטוקינים בסרום

דגימות הדם עברו צנטריפוגה ב-1,500 גרם למשך 10 דקות ב-4 מעלות צלזיוס; לאחר מכן, הסרום נאסף ואוחסן ב-70 מעלות צלזיוס עד לשימוש. הרמות של IL-1β, IL-6, TNF-α, ו-PGE2 בסרום נמדדו באמצעות ערכות ELISA של R&D Systems (Minneapolis, MN, ארה"ב) לפי הוראות היצרן.

2.4.5. ניתוח RT-PCR כמותי בזמן אמת

ה-RNA הכולל הופק מרקמת מפרק הברך באמצעות TRI reagent® (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, ארה"ב), הועתק לאחור ל-cDNA והוגבר PCR באמצעות ערכת TM One Step RT PCR עם ירוק SYBR (Applied Biosystems , גרנד איילנד, ניו יורק, ארה"ב). PCR כמותי בזמן אמת בוצע באמצעות מערכת Applied Biosystems 7500 Real-Time PCR (Applied Biosystems, Grand Island, NY, ארה"ב). רצפי הפריימר ורצף הבדיקה מוצגים בטבלה1. מנות של דגימות cDNA וכמות שווה של GAPDH cDNA הוגברו עם תערובת האב TaqMan® Universal PCR המכילה DNA פולימראז לפי הוראות היצרן (Applied Biosystems, Foster, CA, ארה"ב). תנאי ה-PCR היו 2 דקות ב-50°C, 10 דקות ב-94°C, 15 שניות ב-95°C, ודקה אחת ב-60°C למשך 40 מחזורים. ריכוז גן המטרה נקבע באמצעות שיטת Ct השוואתית (מספר מחזור סף בנקודת הצלבה בין חלקת הגברה לסף), על פי הוראות היצרן.

מחיר FOB:0.5 - 9,999 דולר ארה"ב / חתיכה

כמות הזמנה מינימלית:100 חתיכות/חתיכות

יכולת אספקה:10000 חתיכות/חתיכות לחודש

שלחו לנו מייל

פירוט המוצר

תגיות מוצר

דלקת מפרקים ניוונית (OA) היא הפרעת השרירים והשלד השכיחה ביותר ומחלת המפרק הניוונית השכיחה ביותר בקרב קשישים [1]. OA הוא מצב שנגרם בחלקו מפציעה, אובדן מבנה ותפקוד הסחוס, וחוסר ויסות של מסלולים פרו-דלקתיים ואנטי-דלקתיים [2,3]. זה משפיע בעיקר על הסחוס המפרקי והעצם התת-כונדרלית של המפרקים הסינוביאליים ומביא לאי ספיקת מפרקים, מה שמוביל לכאבים בעת נשיאת משקל כולל הליכה ועמידה.4].

אין תרופה ל-OA, מכיוון שקשה מאוד לשקם את הסחוס ברגע שהוא נהרס.5]. מטרות הטיפול הן לשכך כאבים, לשמור או לשפר את ניידות המפרקים, להגביר את חוזק המפרקים ולמזער את ההשפעות המשביתות של המחלה. טיפולים תרופתיים ב-OA מטרתם להפחית את הכאב על מנת להגביר את תפקוד המפרקים ואיכות חייו של המטופל. למרות שהרס הסחוס הוא האירוע העיקרי ב-OA, הפירוק של קולגן הוא האירוע הבסיסי שקובע את ההתקדמות הבלתי הפיכה של OA בקשר עם דלקת [6,7]. טיפולים עם פעילות נוגדת דלקת וכונדרופקטיבית צפויים להקל על הכאב ולשמור על שלמות המטריצה בחולי OA.

לכן, ירידה בדלקת תהיה מועילה ככל הנראה בניהול OA. מחקרים אחרונים מצביעים על תפקידי הגנה למשאבי צמחי מרפא על התקדמות OA, במונחים של הפחתת דלקת כונדרוציטים והרס סחוס נוסף, באמצעות יכולתם לקיים אינטראקציה עם רקמות הקשורות למפרקים, וכתוצאה מכך להפחתת כאבי פרקים [8].

השורש שלSaposhnikovia divaricataSchischkin (Umbelliferae) נמצא בשימוש נרחב ברפואה המסורתית לטיפול בכאבי ראש, כאבים, דלקות ודלקות פרקים בקוריאה ובסין [9,10]. ההשפעות הפרמקולוגיות המגוונות שלSaposhnikovia divaricata(SD) כוללים גם תכונות אנטי דלקתיות, משככות כאבים, נוגדות חום ואנטי ארטריטיות [9,11]. מחקר שנערך לאחרונה הראה שלתמצית כרומון SD יש השפעות פוטנציאליות לדלקת מפרקים שגרונית במודל עכבר של דלקת מפרקים הנגרמת על ידי קולגן [10]; עם זאת, מעט מחקרים נערכו כדי לתמוך בפעילות האנטי דלקתית ואנטי דלקת מפרקים שלSaposhnikovia divaricataתמצית (SDE).

לכן, המחקר הנוכחי חקר את הפעילות האנטי-דלקתית והאנטי-אוסטאוארטריטיס של תמצית אתנול של 70% של SD. ראשית, ההשפעה האנטי דלקתית של SDE הוערכהבַּמַבחֵנָהבתאי RAW 264.7 המושרים על ידי LPS. לאחר מכן, ההשפעה של דלקת מפרקים ניוונית של SDE נמדדה על ידי הערכת התפלגות נושאת משקל, השפלה של סחוס מפרקי ותגובות דלקתיות במודל חולדה של OA המושרה על ידי מונוסודיום יודואצטט (MIA-).