שמן טהור Saposhnikovia divaricata לייצור נרות וסבון, שמן אתרי מפזר סיטונאי חדש למפזרי מבער ריד

שמן Saposhnikovia divaricata טהור לייצור נרות וסבון, שמן אתרי מפזר סיטונאי חדש למפזרי מבער ריד תמונה ראשית

תיאור קצר:

2.1. הכנת SDE

קני השורש של SD נרכשו כצמח מיובש מחברת Hanherb Co. (גורי, קוריאה). חומרי הצמח אושרו טקסונומית על ידי ד"ר גו-יה צ'וי מהמכון הקוריאני לרפואה מזרחית (KIOM). דגימת שובר (מספר 2014 SDE-6) הופקדה בעשבייה הקוריאנית של משאבי צמחים סטנדרטיים. קני שורש מיובשים של SD (320 גרם) חולצו פעמיים עם אתנול 70% (עם רפלוקס של שעתיים) והתמצית רוכזה לאחר מכן תחת לחץ מופחת. המרתח סונן, עבר ליופיליזציה ואוחסן ב-4 מעלות צלזיוס. תפוקת התמצית המיובשת מחומרי המוצא הגולמיים הייתה 48.13% (משקל/משקל).

2.2. ניתוח כמותי של כרומטוגרפיית נוזלים בעלת ביצועים גבוהים (HPLC)

ניתוח כרומטוגרפי בוצע באמצעות מערכת HPLC (Waters Co., Milford, MA, USA) וגלאי מערך פוטודיודה. לצורך ניתוח HPLC של SDE, ה-prim-Oתקן גלוקוזילצימיפוגין נרכש מהמכון הקוריאני לקידום תעשיית הרפואה המסורתית (גיונגסאן, קוריאה), ו-שניות O-גלוקוזילהמאודול ו-4′-O-β-D-גלוקוזיל-5-Oβ-מתילוויסאמינול בודדו במעבדה שלנו וזוהו באמצעות אנליזות ספקטרליות, בעיקר באמצעות NMR ו-MS.

דגימות SDE (0.1 מ"ג) הומסו באתנול 70% (10 מ"ל). הפרדה כרומטוגרפית בוצעה באמצעות עמודה XSelect HSS T3 C18 (4.6 × 250 מ"מ, 5μm, Waters Co., מילפורד, מסצ'וסטס, ארה"ב). הפאזה הניידת הורכבה מאצטוניטריל (A) ו-0.1% חומצה אצטית במים (B) בקצב זרימה של 1.0 מ"ל/דקה. נעשה שימוש בתוכנית גרדיאנט רב-שלבית כדלקמן: 5% A (0 דקות), 5-20% A (0-10 דקות), 20% A (10-23 דקות) ו-20-65% A (23-40 דקות). אורך הגל של הגילוי נסרק ב-210-400 ננומטר ונרשם ב-254 ננומטר. נפח ההזרקה היה 10.0μL. תמיסות סטנדרטיות לקביעת שלושה כרומונים הוכנו בריכוז סופי של 7.781 מ"ג/מ"ל (prim-O-גלוקוזילצימיפוגין), 31.125 מ"ג/מ"ל (4′-O-β-D-גלוקוזיל-5-O-מתילוויסאמינול), ו-31.125 מ"ג/מ"ל (שניות O-גלוקוזילהמאודול) במתנול ונשמר בטמפרטורה של 4 מעלות צלזיוס.

2.3. הערכת פעילות אנטי-דלקתיתבַּמַבחֵנָה

2.3.1. תרבית תאים וטיפול בדגימה

תאי RAW 264.7 התקבלו מאוסף American Type Culture (ATCC, Manassas, VA, USA) וגודלו במדיום DMEM המכיל 1% אנטיביוטיקה ו-5.5% FBS. התאים הודגרו באווירה לחה של 5% CO2 ב-37°C. כדי לעורר את התאים, המדיום הוחלף במדיום DMEM טרי, וליפופוליסכריד (LPS, Sigma-Aldrich Chemical Co., St. Louis, MO, USA) ב-1μגרם/מ"ל נוסף בנוכחות או בהיעדר SDE (200 או 400μגרם/מ"ל) למשך 24 שעות נוספות.

2.3.2. קביעת תחמוצת החנקן (NO), פרוסטגלנדין E2 (PGE2), גורם נמק גידולי-α(TNF-α), וייצור אינטרלוקין-6 (IL-6)

תאים טופלו ב-SDE ועברו גירוי ב-LPS למשך 24 שעות. ייצור NO נותח על ידי מדידת ניטריט באמצעות ריאגנט Griess לפי מחקר קודם [12הפרשת הציטוקינים הדלקתיים PGE2, TNF-α, ו-IL-6 נקבע באמצעות ערכת ELISA (מערכות R&D) בהתאם להוראות היצרן. השפעות ה-SDE על ייצור NO וציטוקינים נקבעו ב-540 ננומטר או 450 ננומטר באמצעות Wallac EnVision.™קורא מיקרו-צלחות (פרקין אלמר).

2.4. הערכת פעילות אנטי-אוסטאוארתריטיסבגוף חי

2.4.1. בעלי חיים

חולדות ספראג-דאולי זכריות (בנות 7 שבועות) נרכשו מחברת Samtako Inc. (אוסאן, קוריאה) ושוכנו בתנאים מבוקרים עם מחזור אור/חושך של 12 שעות ב...מעלות צלזיוס ו% לחות. חולדות קיבלו תזונה מעבדתית ומיםכרצונךכל הניסויים בוצעו בהתאם להנחיות המכונים הלאומיים לבריאות (NIH) ואושרו על ידי הוועדה לטיפול ושימוש בבעלי חיים של אוניברסיטת דאג'ון (דאג'ון, הרפובליקה של קוריאה).

2.4.2. אינדוקציה של OA עם MIA בחולדות

בעלי החיים חולקו באופן אקראי וחולקו לקבוצות טיפול לפני תחילת המחקר (לכל קבוצה). תמיסת MIA (3 מ"ג/50μליטר של תמיסת מלח 0.9%) הוזרק ישירות לחלל התוך-מפרקי של הברך הימנית תחת הרדמה המושרת על ידי תערובת של קטמין וקסילזין. החולדות חולקו באופן אקראי לארבע קבוצות: (1) קבוצת התמיסה ללא הזרקת MIA, (2) קבוצת ה-MIA עם הזרקת MIA, (3) קבוצת ה-SDE שטופלה (200 מ"ג/ק"ג) עם הזרקת MIA, ו-(4) קבוצת ה-indomethacin (IM-) שטופלה (2 מ"ג/ק"ג) עם הזרקת MIA. החולדות קיבלו SDE ו-IM דרך הפה שבוע לפני הזרקת MIA למשך 4 שבועות. מינון ה-SDE וה-IM ששימש במחקר זה התבסס על אלו ששימשו במחקרים קודמים [10,13,14].

2.4.3. מדידות של פיזור נשיאת משקל בכפות האחוריות

לאחר אינדוקציה של OA, הופרע האיזון המקורי ביכולת נשיאת המשקל של הכפות האחוריות. בודק אי-יכולת (Linton Instrumentation, Norfolk, UK) שימש להערכת שינויים בסבילות נשיאת המשקל. החולדות הוכנסו בזהירות לתא המדידה. ממוצע כוח נשיאת המשקל שהפעילה הגפה האחורית נמדד על פני 3 שניות. יחס התפלגות המשקל חושב לפי המשוואה הבאה: [משקל על הגפה האחורית הימנית/(משקל על הגפה האחורית הימנית + משקל על הגפה האחורית השמאלית)] × 100 [15].

2.4.4. מדידות של רמות ציטוקינים בסרום

דגימות הדם עברו צנטריפוגה ב-1,500 גרם למשך 10 דקות ב-4 מעלות צלזיוס; לאחר מכן נאסף הסרום ואוחסן ב-70 מעלות צלזיוס עד לשימוש. רמות ה-IL-1β, IL-6, TNF-α, ו-PGE2 בסרום נמדדו באמצעות ערכות ELISA של R&D Systems (מיניאפוליס, מינסוטה, ארה"ב) בהתאם להוראות היצרן.

2.4.5. ניתוח כמותי RT-PCR בזמן אמת

RNA כולל חולץ מרקמת מפרק הברך באמצעות ריאגנט TRI® (Sigma-Aldrich, סנט לואיס, מיזורי, ארה"ב), תועתק לאחור ל-cDNA והוגבר באמצעות PCR באמצעות ערכת TM One Step RT PCR עם ירוק SYBR (Applied Biosystems, גרנד איילנד, ניו יורק, ארה"ב). PCR כמותי בזמן אמת בוצע באמצעות מערכת Applied Biosystems 7500 Real-Time PCR (Applied Biosystems, גרנד איילנד, ניו יורק, ארה"ב). רצפי הפריימרים ורצף הגשוש מוצגים בטבלה.1מנות קטנות של cDNA לדוגמה וכמות שווה של cDNA של GAPDH הוגברו באמצעות תערובת אב TaqMan® Universal PCR המכילה DNA פולימראז בהתאם להוראות היצרן (Applied Biosystems, Foster, CA, USA). תנאי ה-PCR היו 2 דקות ב-50°C, 10 דקות ב-94°C, 15 שניות ב-95°C ודקה אחת ב-60°C למשך 40 מחזורים. ריכוז גן המטרה נקבע באמצעות שיטת Ct ההשוואתית (מספר מחזורי סף בנקודת החיתוך בין עלילת ההגברה לסף), בהתאם להוראות היצרן.

מחיר FOB:0.5$ - 9,999$ ליחידה

כמות הזמנה מינימלית:100 יחידות

יכולת אספקה:10000 יחידות/יחידות לחודש

שלחו לנו אימייל

פרטי מוצר

תגי מוצר

דלקת מפרקים ניוונית (OA) היא הפרעת השרירים והשלד השכיחה ביותר ומחלת המפרקים הניוונית הנפוצה ביותר בקרב קשישים [1OA הוא מצב הנגרם בחלקו מפציעה, אובדן מבנה ותפקוד הסחוס, ודיסרגולציה של מסלולים מעודדי דלקת ואנטי דלקת [2,3זה משפיע בעיקר על הסחוס המפרקי ועל העצם התת-סחוסית של המפרקים הסינוביאליים וגורם לכשל מפרקי, מה שמוביל לכאב בעת נשיאת משקל, כולל הליכה ועמידה.4].

אין תרופה לאוסטאוארתריטיס (OA), מכיוון שקשה מאוד לשקם את הסחוס לאחר שהוא נהרס [5מטרות הטיפול הן להקל על הכאב, לשמר או לשפר את ניידות המפרקים, להגביר את חוזק המפרקים ולמזער את ההשפעות המגבילות של המחלה. טיפולים תרופתיים באוסטאוארתריטיס (OA) שואפים להפחית את הכאב על מנת לשפר את תפקוד המפרקים ואת איכות חייו של המטופל. למרות שהרס הסחוס הוא האירוע העיקרי באוסטאוארתריטיס, פירוק הקולגן הוא האירוע הבסיסי שקובע את ההתקדמות הבלתי הפיכה של OA בקשר עם דלקת [6,7טיפולים בעלי פעילות אנטי דלקתית ופעילות כונדרופוטקטיבית צפויים להקל על כאב ולשמור על שלמות המטריקס בחולי OA.

לכן, הפחתת דלקת ככל הנראה תהיה מועילה בטיפול באוסטאוארתריטיס (OA). מחקרים אחרונים מצביעים על תפקידים מגנים של צמחי מרפא על התקדמות ה-OA, מבחינת הפחתת דלקת כונדרוציטים והרס נוסף של סחוס, באמצעות יכולתם לתקשר עם רקמות הקשורות למפרקים, וכתוצאה מכך להפחתת כאבי מפרקים [.8].

השורש שלספושניקוביה דיוואריקטהSchischkin (Umbelliferae) נמצא בשימוש נרחב ברפואה המסורתית לטיפול בכאבי ראש, כאבים, דלקות ודלקת פרקים בקוריאה ובסין.9,10]. ההשפעות הפרמקולוגיות המגוונות שלספושניקוביה דיוואריקטה(SD) כוללים גם תכונות אנטי דלקתיות, משככות כאבים, מורידות חום ואנטי דלקת פרקים [9,11מחקר שנערך לאחרונה הראה כי לתמצית כרומון SD יש פוטנציאל להשפעות אנטי-ראומטואידיות על דלקת מפרקים במודל עכבר של דלקת פרקים הנגרמת על ידי קולגן [10]; עם זאת, נערכו מעט מחקרים התומכים בפעילות האנטי-דלקתית והאנטי-ארתריטיס שלספושניקוביה דיוואריקטהתמצית (SDE).

לכן, המחקר הנוכחי בחן את הפעילות האנטי-דלקתית והאנטי-אוסטאוארתריטיס של תמצית אתנול 70% של SD. ראשית, הוערכה ההשפעה האנטי-דלקתית של SDE.בַּמַבחֵנָהבתאי RAW 264.7 המושרים על ידי LPS. לאחר מכן, נמדדה ההשפעה האנטי-אוסטאוארתריטיס של SDE על ידי הערכת פיזור נשיאת משקל, פירוק הסחוס המפרקי ותגובות דלקתיות במודל חולדה של OA המושרה על ידי מונוסודיום יודואצטט (MIA).